Preparación escala de Mcfarland
Objetivos
Aprender a realizar los diferentes tubos de Mcfarland.
Fundamento
Como referencia en suspensiones bacteriológicas para
saber que el número de bacterias por mililitro, o más bien en UFC según una
escala que va de 0.5 a 10. Estos estándares son creados al mezclar soluciones
de cloruro de bario al 1% con ácido sulfúrico al 1% en volúmenes específicos,
para asegurar la densidad correcta se puede controlar usando
espectrofotómetros.
Los estándares pueden ser visualmente comparados con
suspensiones de bacterias en salina estéril o en caldos. Si la suspensión es
demasiado turbia, puede añadirse diluyente, y si no es lo suficiente turbia, se
puede agregar más bacterias. La ventaja es que no es necesario incubar ni usar
equipo especial para estimar el número de bacterias
Materiales
Tubos de ensayo con tapón, Pipetas 10ml, Micro
pipeta, Espectrofotómetro, Agua estéril.
Reactivos
H2SO4 0,36M ============= BaCl2
0,048M
Procedimiento
Los tubos de turbidez se preparan mezclando productos químicos que generan precipitación
para formar una solución de turbidez reproducible.
Los patrones de Mcfarland se preparan añadiendo ácido sulfúrico a una solución
acuosa de cloruro de bario que produce la formación de un precipitado de
sulfato de bario suspendido. El patrón 0,5 de Mcfarland corresponde aprox. A una
suspensión homogénea de Escherichia Coli de 1,5x10^8 células/ml.
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