Practica 10 / Sesión 7 - Recuento de aerobios mesófilos por filtración

Recuento de aerobios mesófilos por filtración

 

 

Objetivos

Recontar los aerobios mésofilos presentes en el cultivo PCA

Hacer la siembra mediante filtración con kitasato.

Fundamentos

Son todas aquellas bacterias aerobias mesófitas capaces de crecer en agar nutritivo. Se investigan por el método de recuentro en placa con siembra en profundidad, que se basa en contar el nº de colonias desarrolladas en una placa de medio de cultivo solido (agar para reencuentro en placa o PCA) donde se ha sembrado un volumen conocido de la solución madre o sus diluciones incubadas a 37ºC durante 24h.

Materiales

Mechero, Vasos de precipitado, Embudo, Probeta 100 ml, Pipeta Pasteur, Matraz Kitasato, Alcohol, Agua Destilada Estéril, Placa Petri estéril, Pinzas, Mechero Bunsen y Filtro reticulado.

Procedimiento

Preparamos el lugar de trabajo montando el matraz kitasato con sus partes y el aparato de vacío. También encendemos el mechero bunsen, para asi tener condiciones de esterilidad, también preparamos una placa Petri esteril donde colocaremos el agua destilada esteril, para despegar la parte sobrante del filtro con retícula, y un vaso con alcohol para esterilizar los materiales que vayamos a usar.

Flameamos las pinzas para coger así la retícula y lo pasamos a la placa Petri con agua destilada para eliminar la parte pegada.

Una vez tengamos nuestro filtro, lo pasamos al kitasato que tendremos ya colocado, y una vez allí vamos a poner el filtro encima del Kitasato y cerramos con el embudo para filtrar, ponemos las pinzas de seguridad para que no se vaya a caer el embudo

Encendemos la bomba de vacío, y  el agua irá pasando por el filtro de forma rápida.

Una vez que el agua se ha terminado de filtrar, apagamos el aparato y quitamos las pinzas, volvemos a esterilizar las pinzas par coger asi nuestra retícula y pasarla muy rápidamente a una placa de medio PCA y rotulamos dicha placa.

Por último guardar el cultivo boca abajo y a una temperatura de 35-37ºC por ser mesófilos.

Resultado

No obtuvimos resultados de este recuento, ya que se quedaron con un aspecto que no se podían contar